ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）試劑盒的原理主要基于抗原與抗體的特異性結(jié)合以及酶的催化作用，通過化學(xué)反應(yīng)使底物顯色，然后根據(jù)顏色的深淺來進(jìn)行定性或定量分析。以下是幾種常見的 ELISA 試劑盒原理類型：
雙抗體夾心法
原理：使用針對抗原不同決定簇的兩種抗體，一種抗體先包被在固相載體（如聚苯乙烯微孔板）表面，用于捕獲抗原，稱為捕獲抗體。加入待檢測樣本后，樣本中的抗原會與固相載體上的捕獲抗體特異性結(jié)合。然后加入另一種標(biāo)記有酶的抗體，它能與已結(jié)合在捕獲抗體上的抗原的另一個不同表位結(jié)合，形成 “抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 的免疫復(fù)合物。最后加入酶的底物，酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化，顏色的深淺與樣本中抗原的含量成正比。
適用范圍：常用于檢測大分子抗原，如蛋白質(zhì)、多肽等，在檢測病原體抗原、腫瘤標(biāo)志物等方面應(yīng)用廣泛。

間接法
原理：先將抗原包被在固相載體上，然后加入待檢測的含有抗體的樣本，樣本中的抗體與固相載體上的抗原特異性結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的抗人或抗動物免疫球蛋白的二抗，二抗與已結(jié)合在抗原上的特異性抗體結(jié)合，形成 “抗原 - 抗體 - 酶標(biāo)二抗" 的復(fù)合物。加入底物后，酶催化底物顯色，顏色深淺與樣本中抗體的含量相關(guān)。
適用范圍：主要用于檢測各種抗體，如檢測人體血清中的病原體抗體以判斷是否感染過相應(yīng)病原體，或檢測自身抗體用于自身免疫性疾病的診斷等。
競爭法
原理：將特異性抗原和待檢測樣本中的抗體同時(shí)加入到已包被有抗體的固相載體中，樣本中的抗體和酶標(biāo)抗原競爭結(jié)合固相載體上的抗體。如果樣本中抗體含量高，與固相抗體結(jié)合的機(jī)會就大，酶標(biāo)抗原結(jié)合的機(jī)會就少；反之，若樣本中抗體含量低，酶標(biāo)抗原結(jié)合到固相抗體上的機(jī)會就多。洗滌后加入底物，酶標(biāo)抗原與固相抗體結(jié)合得越多，酶催化底物顯色越深，而樣本中抗體的含量與顏色深淺呈反比關(guān)系。
適用范圍：適用于小分子抗原或半抗原的檢測，如檢測藥物殘留、激素等，也可用于檢測抗體效價(jià)較低的樣本。
抗原競爭法
原理：先將特異性抗體包被在固相載體上，加入待檢測樣本和一定量的酶標(biāo)抗原，樣本中的抗原和酶標(biāo)抗原競爭結(jié)合固相載體上的抗體。經(jīng)過洗滌后，加入底物進(jìn)行顯色反應(yīng)，樣本中抗原含量越高，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顏色越淺，即樣本中抗原含量與顏色深淺呈反比。
適用范圍：常用于檢測小分子抗原物質(zhì)，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等的檢測。